One-Step Inactivation（一步失活）技术详解

“One-Step Inactivation”（一步失活）是一种高效、快速使生物活性物质（如病毒、酶、蛋白质等）失去活性的实验方法。该方法广泛应用于分子生物学、临床检测、疫苗研发和生物安全实验室中，旨在简化操作流程、提高实验安全性并减少交叉污染风险。

技术原理

一步失活通常通过添加特定化学试剂（如胍盐、去污剂、醇类或热变性缓冲液）直接裂解样本并同时灭活病原体。整个过程无需离心、洗涤或多步处理，仅需一次混合即可完成样本处理与失活。

主要应用场景

• 新冠病毒等高致病性病毒的样本前处理
• RNA/DNA 提取前的病毒灭活
• 临床标本的快速安全处理
• 高通量核酸检测中的自动化兼容流程

操作优势

• 操作简便：仅需一步加样，节省时间
• 安全性高：有效灭活病原体，降低感染风险
• 兼容性强：可直接用于下游 PCR、测序等分析
• 成本低廉：无需特殊设备，适合基层实验室

注意事项

尽管一步失活法高效便捷，但仍需注意以下几点：

• 确保失活试剂与样本充分混匀
• 验证失活效率（尤其对新型病原体）
• 避免试剂抑制后续分子反应（如 RT-PCR）
• 遵循所在机构的生物安全规范